WWW.LIB.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Электронные материалы
 

«Документ: K279KIR Версия инструкции: 812 НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СВОБОДНОЙ К-ЦЕПИ В CЫВОРОТКЕ И ПЛАЗМЕ КРОВИ Только для ин витро диагностики Номер по ...»

Документ: K279KIR Версия инструкции: 812

НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СВОБОДНОЙ К-ЦЕПИ В CЫВОРОТКЕ И ПЛАЗМЕ КРОВИ

Только для ин витро диагностики

Номер по каталогу: K279K Версия набора: 000

Производитель: ООО «ХЕМА», Санкт-Петербург, Дегтярный переулок 8-10 А

тел./факс (812) 271-24-41, 271-78-70; электронная почта spb@xema.ru, интернет www.xema.ru

1. Назначение

Кроме нативных молекул иммуноглобулинов, состоящих из двух тяжелых и двух легких цепей, в сыворотке крови, спинномозговой жидкости и моче присутствуют также свободные легкие цепи иммуноглобулинов каппа () и лямбда () типов. В норме небольшие количества свободных и -цепей могут продуцироваться В-клетками, а также являться продуктом протеолитической деградации иммуноглобулинов. В последние годы появились данные о протеолитической и антиангиогенной активности, свойственной свободным легким цепям, а также их способности специфически взаимодействовать с тучными клетками и запускать реакции гиперчувствительности различного типа. Значительно повышенный уровень свободных легких цепей в биологических жидкостях наблюдается при множественном склерозе, миеломной болезни, ревматоидном артрите, системной красной волчанке, острых нефритах. Так как время полужизни свободных легких цепей значительно меньше времени полужизни нативных молекул иммуноглобулинов, то определение концентрации свободных легких цепей рекомендуется проводить для контроля эффективности лечения миеломной болезни, амилоидоза и других заболеваний.



2. Принцип работы Набора В данной тест-системе используется принцип двухсайтового (сэндвич) иммуноферментного анализа. В лунки микропланшета, на поверхности которых адсорбированы специфические анти-К-цепь свободная-антитела, вносят исследуемый образец. Антиген из образца связывается с антителами на поверхности лунки. Несвязавшийся материал удаляется отмывкой. В лунки вносят вторые антитела к другому эпитопу К-цепь свободная, меченые пероксидазой. После повторной отмывки активность фермента, связанного с поверхностью лунки микропланшета, проявляется и измеряется добавлением хромоген-субстратной смеси, стоп-раствора и фотометрией при 450 нм. Интенсивность цветной реакции прямо пропорциональна количеству антигена в образце.

3.Состав Hабора:

Код Наименование Кол-во Ед-цы Цвет Планшет полистироловый, разделяемый по лункам, с сорбированными анти- К-цепь 1 P279K 1 шт свободная-антителами 2 N003 Бумага для заклеивания планшета 2 шт 3 S011Z ИФА-Буфер, 50 мл

–  –  –

4. Оборудование и материалы, необходимые при работе с Набором Спектрофотометр для микропланшет, способный проводить измерения при длине волны 450 нм в диапазоне от 0 до 3.0 единиц оптической плотности.

Инкубатор с температурой 37°С Дистиллированная вода

5. Условия хранения и эксплуатации Набора

1. Не смешивайте и не используйте в одной постановке реагенты разных серий.

2. После использования реагента немедленно закрывайте крышку флакона или пробирки. Внимание: закрывайте каждый флакон своей крышкой.

3. Все компоненты набора должны храниться в холодильнике (+2+8°С).

4. После вскрытия пакета тщательно заклейте оставшиеся неиспользованными лунки входящей в состав набора бумагой для заклеивания планшета, чтобы предотвратить воздействие на них влаги.

5. Не используйте для отмывки микропланшета растворы из других ИФА-наборов (например, использующих щелочную фосфатазу), содержащие азид натрия. Азид натрия даже в следовых количествах ингибирует маркёрный фермент - пероксидазу, что может привести к заниженному сигналу.





6. ВНИМАНИЕ! Во время всех инкубаций необходимо заклеивать планшет клейкой лентой. Не допускайте пересыхания лунок микропланшета между стадиями постановки.

7. Все пробы и стандарты желательно ставить в двух параллелях.

8. Исследуемые образцы должны быть тщательно отцентрифугированы. Не используйте мутные, хилезные и гемолитические образцы.

9. Если анализ производится не в день взятия крови, исследуемый образец следует хранить при -20°С. Повторное замораживание-оттаивание не допускается.

10. Отмывка микропланшета может проводиться как вручную, так и с использованием автоматических устройств. Вносите не менее 250 мкл отмывочного буфера в лунку при каждой отмывке. Задержка при отмывке («замачивание») не требуется. После окончания ручной отмывки резко опрокиньте микропланшет на фильтровальную бумагу для удаления остатков буфера.

11. После остановки реакции с субстратом измерьте оптическую плотность в течение 15 минут.

6. Подготовка реагентов для анализа

1) Все реагенты (включая необходимое число распечатанных стрипов) перед использованием должны быть доведены до комнатной температуры (18-25°С).

2) Приготовление отмывочного раствора.

Содержимое флакона с концентратом отмывочного раствора (S008Z, 22 мл) перенести в мерный цилиндр вместимостью 500 мл, добавить 440 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать. В случае дробного использования Набора следует отобрать необходимое количество концентрата отмывочного раствора и развести дистиллированной водой в 21 раз (1 мл концентрата отмывочного раствора + 20 мл дистиллированной воды).

Полученный раствор стабилен в течение 5 суток при комнатной температуре или 30 суток в холодильнике (+2+8°С).

7. Проведение анализа Подготовка образцов (Таблица М)

–  –  –

Поместите в рамку нужное количество стрипов или лунок из расчета: 14 лунок для калибровочных проб и контрольных образцов и необходимое количество исследуемых образцов в 2 повторах. Отметьте лунки, предназначенные для калибровочных проб, контрольных и исследуемых образцов.

Разбавьте образцы cыворотки или плазмы крови буфером S011 (ИФА-Буфер) в 100 раз. Способ разведения для других видов материала приведен в таблице M. Не разбавляйте контрольные образцы и калибровочные пробы!

Если предполагаемая концентрация в образце выше верхней точки калибровочной кривой, дополнительно разбавьте данный образец, используя реагент S011 (ИФА-Буфер). Использование других буферов и реагентов для разбавления образцов может искажать результаты определения!

При исследовании cыворотки или плазмы крови в лунки, предназначенные для исследуемых образцов, внесите по 80 мкл красного ИФА-Буфера. При исследовании других видов материала объем вносимого красного ИФА-Буфера указан в таблице М.

Внесите в соответствующие лунки по 100 мкл калибровочных и контрольных образцов. При исследовании cыворотки или плазмы крови в лунки, предназначенные для исследуемых образцов, внесите 40 мкл разбавленного образца. При исследовании других видов материала объем вносимого образца указан в таблице М. Вносить образцы следует быстро, в течение 3-х минут, чтобы обеспечить равное время инкубации для первых и последних образцов! Перемешайте содержимое лунок осторожными круговыми движениями планшета в горизонтальной плоскости в течение 5-7 секунд и заклейте лунки бумагой для заклеивания планшета (входит в состав набора).

Инкубируйте 30 минут при температуре 37°C.

Приготовьте отмывочный раствор 21-кратным разбавлением концентрата S008Z. Готовый отмывочный раствор можно хранить до 2 недель при +2-8°C. Отмойте стрипы 3 раза отмывочным раствором.

Внесите в лунки по 100 мкл конъюгата.

Инкубируйте 30 минут при температуре 37°C.

Отмойте стрипы 5 раз отмывочным раствором.

Внесите в лунки 100 мкл раствора субстрата тетраметилбензидина (ТМБ).

Инкубируйте 15 минут при температуре 20-25°C Внесите в лунки 100 мкл стоп-реагента.

Определите оптическую плотность в лунках на фотометре при длине волны 450 нм.

Бланк фотометра выставляйте по калибровочной пробе С1 Используйте кусочно-линейный метод для обсчета значений. При анализе различных видов материала необходимо умножить * полученные значения на Фактор пересчета, приведенный в таблице M.

Пример калибровочного графика для данного набора приведен в Паспорте контроля качества.

8. Контроль качества Значения контрольной сыворотки должны попасть в требуемый диапазон (см. Паспорт контроля качества).

9. Ожидаемые значения и нормы Основываясь на результатах исследований, проведенных ООО «ХЕМА», рекомендуем пользоваться нормами, приведенными ниже. Вместе с тем, в соответствии с правилами GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.

Единицы мкг/мл Пол, возраст Нижний предел Верхний предел

Похожие работы:

«PIX/ASA: Установка и устранение неполадок подключения через устройство защиты Cisco Содержание Введение Предварительные условия Требования Используемые компоненты Условные обозначения Как работает возможность подключения через PIX Настройка...»

«Анализ функционирования системы менеджмента качества ФГБУ "Авиаметтелеком Росгидромета" за 2015 год Москва 2016 г. Анализ функционирования системы менеджмента качества ФГБУ "Авиаметтелеком Росгидромета" В Федеральном государственн...»

«Mighty Mouse Инструкция по эксплуатации Начало работы с вашей Mighty Mouse Поздравляем вас с приобретением беспроводной мыши Mighty Mouse! Используйте этот буклет для того, чтобы быстро настроить...»

«Перепечатка разрешается безвозмездно. ПИСЬМА ПОДГОТОВКА ТЕКСТА И КОМ М ЕНТАРИИ А. С. П Е Т Р О В С К О Г О РЕДАКЦИОННЫЕ ПОЯСНЕНИЯ1 В томе шестьдесят девятом публикуются тексты 154 писем Л. Н. Толстого за 1896 г. Из них 92 письма печатаются впервые, 50 печатаются по автографам...»

«"РАСТИТЕЛЬНЫЙ И ЖИВОТНЫЙ МИР БАССЕЙНА ОЗЕРА ТУНАЙЧА " Семёнова Татьяна Геннадьевна студентка V курса специальность география Сахалинский государственный университет Научный руководитель: Литенко Н. Л., к.г.н., доцент...»

«МОДУЛЬ РАБОТЫ С КОНТРАГЕНТАМИ (CRM) СИСТЕМ ЭЛЕКТРОННОГО ДОКУМЕНТООБОРОТА И ЭЛЕКТРОННОГО АРХИВА ДОКУМЕНТОВ "ЭТЛАС" (версия 5.0) 2014 год Модуль "Контрагенты" Версия 5.0 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ МЕНЮ “КОНТРАГЕНТЫ...»

«Задачи одномерной упаковки и двумерного замощения прямоугольниками и их применение в промышленности В. В. Осокин, Р. Ф. Алимов, Т. Р. Сытдыков В данной статье рассматривается решение двух задач: одномерная упаковка в одинаковые контейнеры и двумерное замощение прямоугольной области с программной реализацией на языке PHP. Для первой зада...»

«О РЕЛИГИОЗНЫХ ИСТОЧНИКАХ ПОЭМЫ В. ХЛЕБНИКОВА "АНГЕЛЫ" Л.В. Евдокимова Астраханский государственный университет ул. Татищева, 20а, Астрахань, Россия, 414056 В статье излагаются новые аргументы, подтве...»

«Мухамеджанов Игорь Ражапович ПРОБЛЕМЫ СОЗДАНИЯ И БОЕВОГО ПРИМЕНЕНИЯ ИСТРЕБИТЕЛЬНОЙ АВИАЦИОННОЙ АРМИИ В 1942 Г. В статье рассматриваются обстоятельства формирования в 1942 г. в качестве резерва Верховного Главнокомандования РККА...»








 
2017 www.lib.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - электронные материалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.