WWW.LIB.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Электронные материалы
 

Pages:     | 1 ||

«РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (19) (11) (13) RU 2 521 329 C2 (51) МПК A61K 31/7105 (2006.01) A61K 38/18 (2006.01) A61P 17/02 (2006.01) ...»

-- [ Страница 2 ] --

Для определения динамики изменений экспрессии коннексинов при повреждении измеряли окрашивание на коннексины по краям раны (WE) и в примыкающей зоне на расстоянии 500 мкм (AD) через 1 и 2 дня после нанесения раны, тогда как через 5 дней делали снимки кератиноцитов переднего края (LE) (фиг.2А). Через 1 день после нанесения раны отмечалось значительное снижение окрашивания на коннексин 43 в контрольных кератиноцитах в зоне WE по сравнению с зоной AD (фиг.2С, 3а и 3а'). В явном противоречии с этим у диабетических животных отмечалось значительное повышение окрашивания на коннексин 43 в зоне WE по сравнению с зоной AD. Это было противоположно нормальному заживлению ран и было неожиданным, поскольку уровень коннексина 43 значительно снижался в интактной коже при диабете. Динамика изменений коннексина 26 была одинаковой в диабетической и контрольной коже, со значительным повышением окрашивания в зоне WE (фиг.2D, 3b и 3b'), хотя в диабетической коже повышение окрашивания на коннексин 26 не ограничивалось зоной WE, как в контроле, но распространялось на некоторое расстояние в зону AD, что означает больший разброс в реакции на повреждение. Кроме того, оказалось, что кератиноциты переднего края раны образуют утолщенную луковицу в диабетической ткани, тогда как в контроле они редели, а затем наползали вперед, закрывая рану.

Через 2 дня в контрольных ранах начиналась реэпителизация (12% закрытых), но диабетические раны отставали (5% закрытых), еще только лишь приняв мигрирующую морфологию. Это изменение формы диабетических кератиноцитов сопровождалось значительным снижением окрашивания на коннексин 43 в пределах зоны WE, которая на этой стадии походила на контрольную (фиг.2С, 3с и 3с'). Однако в кожных ранах при диабете уровень окрашивания на коннексин 26 продолжал возрастать в обеих зонах WE и AD (фиг.2D, 3d и 3d'), свидетельствуя о более широкой реакции ткани на повреждение.



Через 5 дней реэпителизация хорошо продвинулась в группах диабета и контроля, хотя диабетические раны значительно отставали (20% закрытых по сравнению с 33% в контроле; р0,008; обобщенный попарный критерий Уилкоксона со знаком; фиг.2С).

В обеих группах диабета и контроля в кератиноцитах зоны LE окрашивание на

Стр.: 38 RU 2 521 329 C2

коннексин 43 оказалось слабым. Оно значительно возрастало в зонах WE и AD, но меньше в диабетической коже, в которой, как и в интактной коже, экспрессировалось меньше коннексина 43, чем в контроле (фиг.2С, 3е и 3е'). На этой стадии также возрастало окрашивание на коннексин 26 в зоне LE как при диабете, так и в контроле (фиг.2D, 3f и 3f'). Ранее повышенное окрашивание на коннексин 26 в зонах WE и AD при диабете почти вернулось к норме. Реэпителизация у животных в контроле и при диабете завершилась через 10 дней, когда наблюдался высокий уровень коннексина 43 в пролиферативном, сильно утолщенном эпидермисе.

На фиг.4А-4С представлены эффекты применения антисмыслового олигодезоксинуклеотида к коннексину 43 ("Cx43asODN) на экспрессию коннексина 43 через 1 день после нанесения раны и на скорость реэпителизации через 1, 2 и 5 дней после нанесения раны по сравнению с контрольным смысловым олигодезоксинуклеотидом к коннексину 43 ("sODN"). Повышенный уровень окрашивания на коннексин 43 (зеленые точки) наблюдается в утолщенной луковице эпидермиса на краю раны при диабете через 1 день после нанесения раны (фиг.4А).

Однако это повышение экспрессии белка коннексина 43 предотвращалось при обработке asODN к коннексину 43, что также ведет к поредению слоя кератиноцитов,который больше похож на контроль, чем на луковицу клеток (фиг.





4 В). Обработка пар ран в контроле и при диабете с помощью asODN или контрольного sODN приводит к удвоению скорости реэпителизации после применения asODN во все исследованные моменты времени (фиг.4С). Скорость реэпителизации в диабетической коже при обработке asODN близка скорости в контрольной коже при обработке sODN через 1 и 2 дня после нанесения раны, но становится значительно быстрее через 5 дней после нанесения раны.

Метка масштаба: 50 мкм.

После наблюдения такой аномальной картины иммуноокрашивания на коннексин, коммуникации через щелевые контакты и морфологической реакции в ранах при диабете исследовали эффект аномального повышения белка коннексина 43 в диабетических кератиноцитах зоны WE, предотвращая это повышение с помощью специфичного к коннексину 43 антисмыслового геля, который наносили на рану во время повреждения.

При этом эффективно предотвращалось повышение коннексина 43 (фиг.4А), а также улучшалась скорость заживления ран, которая удваивалась, достигая уровня контроля без обработки или больше (фиг.4В), хотя скорость заживления была еще выше в ранах, обработанных антисмысловым гелем у контрольных крыс.

Механизм, посредством которого диабет вызывает изменения экспрессии коннексинов, оказывая разнонаправленные эффекты на различные белки коннексинов, неизвестен. В возникновении других осложнений диабета, таких как невропатия и ангиопатия, подозревается гипергликемия и/или окислительный стресс, вызванный гипергликемией (American Diabetes Association (1999) Consensus development conference on diabetic foot wound care: 7-8 April 1999, Boston, Massachusetts). Высокий уровень глюкозы и окислительный стресс in vitro, как сообщалось, вызывают изменения экспрессии коннексинов и/или коммуникации через щелевые контакты в нескольких различных типах клеток (Fukuda Т et al. (2000) J. Gastroenterol. 35: 361-368; Cho JH et al. (2002) Carcinogenesis 23(7): 1163-9; Rouach N et al. (2004) Glia 45(1): 28-38), причем известно, что коннексин 43 и коннексин 26 имеют разные промоторы (Hennemann Н et al. (1992) Eur.

J. Cell Biol. 58(1): 81-9; Chen ZQ et al. (1995) J. Biol. Chem. 270(8): 3863-8)).

Однако нарушение заживления ран отмечалось у крыс уже через 1 неделю после индукции диабета, еще до возникновения невропатии и ангиопатии (Witte MB et al.

(2002) Br. J. Surg. 89: 1594-1601; Shi HP et al. (2003) Wound Repair Regen 11: 198-203). Таким

Стр.: 39 RU 2 521 329 C2

образом, изменения, наблюдавшиеся в этих экспериментах в пределах 2 недель, вероятно, являются прямым следствием заболевания диабетом, а не вторичным последствием долгосрочных осложнений диабета.

Значительным результатом является аномальное возрастание коннексина 43 в эпидермисе на краю раны при диабете. Это может повлиять на процесс закрытия раны различным образом. Высказывалось предположение, что в заживлении ран играет роль образование коммуникационных компартментов (ячеек) в регенерирующем эпидермисе (Martin Р (1997) Science 276: 75-81; Lampe PD et al. (1998) J. Cell Biol. 143(6): 1735-47;

Hodgins M (2004) J. Invest. Dermatol. 122: commentary). Компартментализация могла бы эффективно возникать в нормальных условиях при экспрессии коннексина 26 и удалении коннексина 43 в клетках переднего края, так как эти коннексины не образуют соединений друг с другом. Следовательно, задержка в заживлении ран при диабете могла бы отражать дополнительное время, необходимое для подавления экспрессии коннексина 43 до такого уровня, когда сможет произойти такая Компартментализация. С другой стороны, известно, что С-конец коннексина 43 взаимодействует с компонентами цитоскелета или с ГТФазой P120ctn/Rho, так что понижающая регуляция коннексина 43 могла быть нужна для изменения подвижности кератиноцитов на краю раны, позволяя им мигрировать и закрыть рану (Wei CJ et al. (2004) Annu. Rev. Cell. Dev. Biol.

20: 811-38). В этом отношении примечательно, что через 1 день после нанесения раны, когда экспрессия коннексина 43 была высокой, диабетические кератиноциты образовывали утолщенную луковицу на краю раны, а не распластывались и не начинали наползать на рану.

Авторы показали, что подавление экспрессии коннексина 43 путем однократного нанесения специфичного к коннексину 43 антисмыслового геля во время нанесения раны дает возможность осуществления всего процесса, от начальной миграции до полного закрытия раны, с нормальной и даже более высокой скоростью несмотря на наличие заболевания диабетом. Таким образом, обработка антиконнексиновым олигонуклеотидом, к примеру антисмысловым, обладает значительным потенциалом в качестве нового подхода к лечению ран, не заживающих с ожидаемой скоростью, включая хронические раны у диабетических и других пациентов.

Пример 2 Изобретение было успешно применено для лечения субъекта - человека с большой хронической раной, в данном случае васкулитной язвой, на благотворительной основе.

49-летний мужчина с основным заболеванием периферических сосудов впервые обратился по поводу осложнений, возникающих от незаживающей раны на ноге. Этот пациент подвергался ампутации левой ноги ниже колена вследствие травмы, которая впоследствии раскрылась в результате падения. На протяжении более чем 6 месяцев рана не реагировала на все формы общепринятого лечения. Пациент неоднократно подвергался местной обработке в попытках заживления раны, включая применение фактора роста, антимикробных повязок, VAC (закрытие с помощью вакуума), материала с ксенотрансплантатом, но без существенных изменений. Пациент снова упал и дополнительно повредил раневой очаг. За этим последовали множественные хирургические обработки и замена ксенотрансплантата. Рана продолжала увеличиваться в размере и была признана угрожающей всей конечности.

Так, из-за характера раны и уровня и типа ампутации было признано, что у пациента нет другого выбора лечения, кроме как пройти ампутацию выше колена. Отдел дерматологии FDA одобрил применение экспериментального препарата подателей заявки (SEQ ID NO:1) для этого пациента под рубрикой применения в крайнем случае.

Стр.: 40 RU 2 521 329 C2

После этого рану обработали 2 мл 20 мкМ препарата SEQ ID NO: 1 в геле Pluronic (общая доза 400 мкг). Во время нанесения препарата рана составляла примерно 7 см 5 см (около 35 см2) при глубине в 3-4 мм. Таким образом, было введено около 12 мкг/ см2 SEQ ID NO:1. Рану перевязали и оставили закрытой на протяжении 7 дней. После снятия повязки через 7 дней врач сообщил, что больше не было отека и эритемы, а рана как будто начала зарастать, хотя ее размеры (длина и ширина) остались почти такими же на этой стадии.

Провели вторую обработку (общая доза 400 мкг). После этой обработки рана продолжала заживать, и глубина повреждения впоследствии составила 1 мм (уменьшилась в 3-4 раза) с 1-1,5 см2 новой ткани со всех сторон. Рана была чистой, а грануляционная ткань имела "здоровый" вид. Пациент был признан "готовым к пересадке", если бы можно было использовать другую ткань для пересадки, например бедро. Однако это оказалось невозможным для данного пациента из-за наличия у него основного заболевания периферических сосудов.

Никаких опасений по поводу безопасности после этого экспериментального лечения не возникало и не было отмечено. Пациента снова подвергали осмотру через 2 месяца, и рана продолжала уменьшаться по размеру. Размер раны уменьшился приблизительно в 7 раз, до 5 см2, и медперсонал, проводивший осмотр раны, пришел к выводу, что рана дойдет до полного закрытия. Было установлено, что ампутация выше колена больше не нужна.

Пример 3 Изобретение было успешно применено для лечения субъекта - человека с хронической венозной раной. 86-летний мужчина с основным заболеванием - периферическим отеком, обратился по поводу осложнений от 5-месячной незаживающей хронической венозной язвы. За этот период рана не реагировала на все формы общепринятого лечения по месту жительства. Пациент неоднократно подвергался местной обработке в попытках заживления раны, включая антимикробные средства и наложение давящей повязки для уменьшения отека. За этот период времени рана продолжала увеличиваться в размере.

Пациенту была назначена операция протезирования колена, но его поставили в известность, что операция невозможна при наличии открытой хронической раны.

Так, из-за характера раны, которая к тому же была воспалена и распухла в своем ложе и особенно по краям, пациент был признан подлежащим благотворительности, и от него было получено информированное согласие на лечение. После этого рану обработали 200 мкл 10 мкМ препарата SEQ ID NO:1 в геле Pluronic (общая доза примерно 20 мкг). Во время нанесения препарата рана составляла примерно 3 см3 см (около 9 см2) при глубине в 2-3 мм. Таким образом, общая доза составила около 2,2 мкг/см2.

Затем рану перевязали неприлипающей повязкой на 24 часа.

После снятия повязки через 24 часа больше не было воспаления и отека, а рана стала подсыхать. Рану затем оставили без повязки до прошествия 72 часов после обработки, за это время прежде незаживающая кожная язва полностью засохла и поверх нее образовался струп. После этого рану перевязали и снова осматривали через 1 неделю, за это время ее размеры (длина и ширина) значительно уменьшились, не было воспаления и отека, а рана заживала и приближалась к закрытию.

Вторую обработку (общая доза примерно 40 мкг SEQ ID NO:1) проводили через 1 месяц после нового повреждения раны, которое привело к прекращению закрытия.

После этой обработки была наложена давящая повязка для уменьшения отека и рана снова начала быстро заживать. Повреждение уменьшилось по глубине, ширине и длине, Стр.: 41 RU 2 521 329 C2 а новая кожа там, где рана зажила, имела здоровый вид.

Никаких опасений по поводу безопасности после этого экспериментального лечения не возникало и не было отмечено. Пациента снова подвергали осмотру через 6 недель.

Рана уменьшилась приблизительно в 4 раза от первоначального размера и приближалась к закрытию.

–  –  –

квалификации специалистов в той области, к которой относится изобретение, и каждый такой приведенный документ или материал включен в настоящее изобретение путем ссылки в той же степени, как если бы он был включен индивидуально путем ссылки во всей полноте или изложен в настоящем изобретении во всей полноте. Заявители оставляют за собой право физически включать в настоящее описание любые материалы и информацию из таких патентов, публикаций, научных статей, веб-сайтов, электронной информации и других приведенных материалов или документов.

Конкретные способы и композиции, описанные в настоящем изобретении, являются репрезентативными для предпочтительных воплощений и типичными и не могут служить в качестве ограничения рамок изобретения. Другие предметы, аспекты и воплощения, которые могут возникнуть у специалистов в этой области после рассмотрения настоящего описания, охватываются сущностью изобретения, как это определено рамками формулы изобретения. Специалистам должно быть известно, что в изложенном здесь изобретении можно делать различные замены и модификации, не выходящие за рамки и не отходящие от сути изобретения. Описанное для иллюстрации изобретение обычно может применяться на практике в отсутствие какого-либо элемента или элементов либо ограничения или ограничений, которые не указаны конкретно как существенные. Так, например, во всяком случае в воплощениях или примерах настоящего изобретения любой из терминов "включающий", "состоящий в основном из" и "состоящий из" может быть заменен любым из двух других терминов в описании.

Также и термины "состоящий", "включающий", "содержащий" и т.д. следует понимать в расширительном смысле и без ограничения. Способы и процессы, описанные в изобретении для иллюстрации, обычно могут применяться на практике и в другом порядке стадий, а не обязательно ограничиваться порядком стадий, указанным в описании или формуле изобретения. Кроме того, в настоящем описании и формуле изобретения употребление форм единственного числа включает значения множественного, если только контекст четко не предписывает иначе. Ни при каких обстоятельствах не следует полагать, будто патент ограничивается конкретными примерами, воплощениями или способами, специально в нем раскрытыми. Ни при каких обстоятельствах не следует полагать, будто патент ограничивается каким-либо утверждением со стороны экспертизы либо иных чиновников или работников Ведомства по делам патентов и товарных знаков, если только такое утверждение специально и безоговорочно не принято в явном виде в письменном ответе заявителей.

Используемые термины и выражения применяются как термины для описания, а не ограничения, и притом без намерения использовать такие термины и выражения для исключения каких-либо эквивалентов представленных и описанных особенностей или их частей, однако признается, что в рамках заявленного изобретения возможны различные модификации. Так, следует понимать, что хотя настоящее изобретение было изложено конкретно в виде предпочтительных воплощений и необязательных особенностей, однако специалисты в этой области могут предпринимать модификации и вариации приведенных в нем концепций, причем такие модификации и вариации считаются входящими в рамки настоящего изобретения, как определено в прилагаемой формуле изобретения.

Изобретение было описано в широком и общем смысле. Каждая из более узких и менее общих разновидностей, попадающих под общее описание, является составной частью изобретения. Сюда входит и общее описание изобретения с каким-либо условием или отрицательным ограничением, устраняющим какую-либо тематику из общего целого, независимо от того, указан в нем специально или нет устраняемый материал.

Стр.: 43 RU 2 521 329 C2

Другие воплощения входят в рамки нижеследующей формулы изобретения. Кроме того, если какие-то особенности или аспекты изобретения описаны в терминах групп Маркуша, то специалисты в этой области должны понимать, что изобретение при этом также описано и в отношении индивидуальных членов или подгруппы членов группы Маркуша.

Формула изобретения

1. Способ лечения субъекта, имеющего медленно заживающую, плохо заживающую, неполностью заживающую, раскрывающуюся или хроническую рану, который включает введение в рану от примерно 0,001 до примерно 1 мг/кг массы тела полинуклеотида против коннексина 43 в фармацевтически приемлемом носителе.

2. Способ по п.1, в котором полинуклеотид против коннексина 43 вводится на протяжении по меньшей мере примерно 0,5 ч, по меньшей мере примерно 1-2 ч, по меньшей мере примерно 2-4 ч, по меньшей мере примерно 4-6 ч или по меньшей мере примерно 6-8 ч.

3. Способ по п.1, в котором рана представляет собой рану с разошедшимися краями.

4. Способ по п.1, в котором рана представляет собой медленно или неполностью заживающую рану.

5. Способ по п.1, в котором рана представляет собой хроническую рану.

6. Способ по п.1, в котором рана представляет собой васкулитную язву.

7. Способ по п.1, в котором рана представляет собой венозную язву или трофическую язву.

8. Способ по п.1, в котором рана представляет собой артериальную язву.

9. Способ по п.1, в котором рана представляет собой пролежень или язвенный пролежень.

10. Способ по п.1, в котором рана представляет собой диабетическую язву.

11. Способ по п.1, в котором рана представляет собой кожную язву, возникшую в результате травмы.

12. Способ по п.1, в котором рана представляет собой кожную язву, возникшую в результате ожога.

13. Способ по п.1, в котором субъект болен диабетом.

14. Способ по п.1, в котором субъектом является человек.

15. Способ по п.1, в котором субъектом является животное, отличное от человека.

16. Способ по п.15, в котором животное представляет собой лошадь.

17. Способ по п.15, в котором животное представляет собой собаку.

18. Способ по п.15, в котором животное представляет собой кошку.

19. Способ по п.1, в котором полинуклеотид против коннексина 43 вводят в количестве, составляющем от приблизительно 1 до приблизительно 500 мкг на см2 раны.

20. Способ по п.19, в котором введение полинуклеотида против коннексина 43 является многократным.

21. Способ по п.1, в котором введение полинуклеотида против коннексина 43 является многократным.

22. Способ по п.19, в котором введение полинуклеотида против коннексина 43 повторяют примерно раз в неделю, усиливая тем самым заживление ран.

23. Способ по п.1, в котором введение полинуклеотида против коннексина 43 повторяют примерно раз в неделю, усиливая тем самым заживление ран.

24. Способ по п.1, в котором композиция содержит от примерно 0.001 до примерно

–  –  –

0.1 мг/кг массы тела полинуклеотида против коннексина 43.

25. Способ по п.1, в котором композиция содержит от примерно 0.001 до примерно

0.01 мг/кг массы тела полинуклеотида против коннексина 43.

26. Способ по п.1, где количество введенного полинуклеотида против коннексина 43 находится в диапазоне от примерно 0.001 г до примерно 1.0 мг/кг массы тела.

27. Способ по п.1, где количество введенного полинуклеотида против коннексина 43 находится в диапазоне от примерно 0.1 мг до примерно 1 мг/кг массы тела.

28. Способ по п.1, где количество введенного полинуклеотида против коннексина 43 составляет примерно 1 мг/кг массы тела.

29. Способ лечения субъекта с медленно заживающей, неполностью заживающей раскрывающейся или хронической раной, который включает введение в рану композиции, содержащей антисмысловой полинуклеотид к коннексину 43 и фармацевтически приемлемый носитель, где количество вводимого в указанную рану указанного полинуклеотида, направленного против коннексина 43, находится в диапазоне от примерно 0,01 мг до примерно 10 мг/кг массы тела.

30. Способ по п.29, где введение композиции эффективно для понижающей регуляции экспрессии коннексина 43 на продолжительное время.

31. Способ по п.30, в котором экспрессия коннексина 43 подвергается понижающей регуляции по меньшей мере приблизительно на 0,5 ч, по меньшей мере приблизительно на 1-2 ч, по меньшей мере приблизительно на 2-4 ч, по меньшей мере приблизительно на 4-6 ч или по меньшей мере приблизительно на 6-8 ч.

32. Способ стимуляции заживления ран у субъекта с медленно заживающей или хронической раной, который включает введение в область раны композиции, включающей терапевтически эффективное количество антисмыслового полинуклеотида к коннексину 43 и фармацевтически приемлемый носитель, где количество вводимого в указанную рану указанного полинуклеотида, направленного против коннексина 43, находится в диапазоне от примерно 0,01 мг до примерно 10 мг/кг массы тела эффективно для увеличения скорости реэпителизации в области раны.

33. Способ по любому из пп.1-32, в котором полинуклеотид против коннексина 43 или антисмысловой полинуклеотид к коннексину 43 вводят в лекарственной форме для продолжительного высвобождения.

34. Способ по п.32, в котором полинуклеотид вводят в течение продолжительного времени.

35. Способ по п.32, в котором антисмысловой полинуклеотид эффективен для снижения уровня коннексина 43 по меньшей мере приблизительно на 0,5 ч, по меньшей мере приблизительно на 1-2 ч, по меньшей мере приблизительно на 2-4 ч, по меньшей мере приблизительно на 4-6 ч или по меньшей мере приблизительно на 6-8 ч.

36. Способ стимуляции реэпителизации кожных ран, который включает введение субъекту с медленно заживающей, неполностью заживающей или хронической раной композиции, содержащей полинуклеотид против коннексина 43 и фармацевтически приемлемый носитель, где количество вводимого в указанную рану указанного полинуклеотида, направленного против коннексина 43, находится в диапазоне от примерно 0,01 мг до примерно 10 мг/кг массы тела, эффективно для стимуляции реэпителизации.

37. Способ стимуляции заживления ран у субъекта с медленно заживающей, неполностью заживающей или хронической раной, который включает введение в рану фармацевтической композиции, содержащей антисмысловой полинуклеотид к коннексину 43 и антисмысловой полинуклеотид к коннексину 31.1, где количество

Стр.: 45 RU 2 521 329 C2

вводимого в указанную рану указанного полинуклеотида, направленного против коннексина 43, находится в диапазоне от примерно 0,01 до примерно 10 мг/кг массы тела.

38. Способ повышения скорости заживления ран у диабетического субъекта с раной, который включает введение в рану субъекту композиции, содержащей полинуклеотид против коннексина 43 и фармацевтически приемлемый носитель, где количество вводимого в указанную рану указанного полинуклеотида, направленного против коннексина 43, находится в диапазоне от примерно 0,01 до примерно 10 мг/кг массы тела.

39. Способ по п.38, где количество полинуклеотида против коннексина 43 эффективно для снижения аномальной регуляции коннексина 43 в ране или в области раны.

40. Способ по п.38, где рана является медленно заживающей раной или неполностью заживающей раной.

41. Способ по п.38, где рана является хронической раной.

42. Способ улучшения закрытия ран у диабетического субъекта с раной, который включает введение в рану композиции, содержащей полинуклеотид против коннексина 43 и фармацевтически приемлемый носитель, где количество вводимого в указанную рану указанного полинуклеотида, направленного против коннексина 43, находится в диапазоне от примерно 0,01 мг до примерно 10 мг/кг массы тела.

43. Способ лечения субъекта, имеющего медленно заживающую, плохо заживающую, неполностью заживающую, раскрывающуюся или хроническую рану, который включает введение в рану композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и полинуклеотид против коннексина 43, присутствующий в концентрации, находящейся в диапазоне от примерно 30 мкМ до примерно 200 мкМ.

44. Способ по п.43, где указанный полинуклеотид против коннексина 43 присутствует в концентрации, находящейся в диапазоне от примерно 30 мкМ до примерно 200 мкМ.

45. Способ по п.43, где указанный полинуклеотид против коннексина 43 присутствует в концентрации, находящейся в диапазоне от примерно 30 мкМ до примерно 100 мкМ.

46. Способ по п.43, где указанный полинуклеотид против коннексина 43 присутствует в концентрации примерно 200 мкМ.

47. Способ лечения субъекта, имеющего медленно заживающую, плохо заживающую, неполностью заживающую, раскрывающуюся или хроническую рану, который включает введение в рану композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и полинуклеотид против коннексина 43, присутствующий в концентрации, находящейся в диапазоне от примерно 30 мкг до примерно 500 мкг.

48. Способ по п.47, где количество вводимого полинуклеотида против коннексина 43 находится в диапазоне от примерно 50 до примерно 500 мкг/см2 указанной раны.

49. Способ по п.47, где количество вводимого полинуклеотида против коннексина 43 находится в диапазоне от примерно 100 до примерно 500 мкг/см2 указанной раны.

50. Способ по п.47, где количество вводимого полинуклеотида против коннексина 43 находится в диапазоне от примерно 150 до примерно 500 мкг/см2 указанной раны.

51. Способ по п.47, где количество вводимого полинуклеотида против коннексина 43 находится в диапазоне от примерно 200 до примерно 500 мкг/см2 указанной раны.

52. Способ по п.47, где количество вводимого полинуклеотида против коннексина 43 находится в диапазоне от примерно 250 до примерно 500 мкг/см2 указанной раны.

53. Способ по п.47, где количество вводимого полинуклеотида против коннексина

Стр.: 46 RU 2 521 329 C2

43 находится в диапазоне от примерно 100 до примерно 250 мкг/см2 указанной раны.

54. Способ по п.47, где количество вводимого полинуклеотида против коннексина 43 находится в диапазоне от примерно 100 до примерно 200 мкг/см2 указанной раны.

55. Способ лечения субъекта, имеющего медленно заживающую, плохо заживающую, неполностью заживающую, раскрывающуюся или хроническую рану, который включает введение в рану полинуклеотида против коннексина 43 в фармацевтически приемлемом носителе, где количество введенного полинуклеотида против коннексина 43 составляет по меньшей мере 1 мг/кг массы тела.

56. Способ лечения субъекта с хронической раной на коже, который включает введение в рану от примерно 0,01 мг до примерно 10 мг/кг массы тела одноцепочечного олигодезоксинуклеотида против коннексина 43 в фармацевтически приемлемом носителе.

57. Способ по п.56, где способ включает введение от примерно 0,01 мг до примерно 1 мг на кг массы тела одноцепочечного олигодезоксинуклеотида против коннексина 43 в фармацевтически приемлемом носителе.

58. Способ лечения субъекта с хронической раной на коже, который включает введение в рану терапевтически эффективного количества композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и от примерно 0,5 мг до примерно 1,0 мг одноцепочечного олигодезоксинуклеотида против коннексина 43, присутствующего в объемной дозе, находящейся в диапазоне примерно 25-100 мкл, примерно 100-200 мкл, примерно 200-500 мкл, примерно 500-1000 мкл.

59. Способ лечения субъекта с хронической раной на коже, который включает введение в рану терапевтически эффективного количества композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и одноцепочечный олигодезоксинуклеотид против коннексина 43 в концентрации от примерно 0.5 до примерно 40.0 мг/мл.

60. Способ по п.59, где олигодезоксинуклеотид против коннексина 43 присутствует в концентрации от примерно 0.5 до примерно 2.0 мг/мл.

61. Способ по п.59, где олигодезоксинуклеотид против коннексина 43 присутствует в концентрации от примерно 1 до примерно 5 мг/мл.

62. Способ по п.59, где олигодезоксинуклеотид против коннексина 43 присутствует в концентрации от примерно 1.5 до примерно 10 мг/мл.

63. Способ по п.59, где олигодезоксинуклеотид против коннексина 43 присутствует в концентрации от примерно 5 до примерно 40 мг/мл.

64. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, в котором полинуклеотид против коннексина 43 представляет собой полинуклеотид РНКи.

65. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, в котором полинуклеотид против коннексина 43 представляет собой полинуклеотид миРНК.

66. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, в котором полинуклеотид против коннексина 43 представляет собой антисмысловой полинуклеотид к коннексину 43.

67. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, в котором антисмысловой полинуклеотид к коннексину 43 содержит от приблизительно 18 до приблизительно 32 нуклеотидов.

68. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, в котором полинуклеотид представляет собой олигодезоксинуклеотид.

69. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, в котором антисмысловой полинуклеотид включает последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2.

70. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, в котором Стр.: 47 RU 2 521 329 C2 антисмысловой полинуклеотид по меньшей мере на 70% гомологичен SEQ ID NO: 1 или 2.

71. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, в котором антисмысловой полинуклеотид к коннексину 43 гибридизуется с мРНК коннексина 43 в условиях средней или высокой жесткости.

72. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где фармацевтически приемлемый носитель содержит сополимер полиоксиэтиленполиоксипропилен.

73. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где фармацевтически приемлемый носитель содержит Pluronic F-127.

74. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где фармацевтически приемлемый носитель содержит альгинат.

75. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где фармацевтически приемлемый носитель содержит гидрогель.

76. Способ по п.75, где фармацевтически приемлемый носитель, содержащий гидрогель выбран из группы, состоящей из гидрогелей, содержащих производные целлюлозы, и гидрогелей, содержащих полиакриловую кислоту.

77. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где фармацевтически приемлемый носитель - это основанный на целлюлозе носитель.

78. Способ по п.77, где фармацевтически приемлемый носитель, содержащий основанный на целлюлозе носитель, выбран из группы, состоящей из гидроксиэтилцеллюлозы, гидроксиметилцеллюлозы, карбоксиметилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы и их смеси.

79. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где композиция составлена для замедленного высвобождения.

80. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где композиция составлена для медленного высвобождения, пролонгированного высвобождения или контролируемого высвобождения.

81. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где композиция представляет собой гель.

82. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где композиция представляет собой крем, мазь, эмульсию, лосьон, спрей, бальзам, пену или краску.

83. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где рана характеризуется по меньшей мере частично увеличенной экспрессией коннексина 43.

84. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где рана характеризуется по меньшей мере частично воспалением.

85. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где рана представляет собой рану с разошедшимися краями.

86. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где рана представляет собой хроническую рану, по меньшей мере частично характеризующуюся воспалением.

87. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где рана представляет собой трофическую язву.

88. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где рана представляет собой артериальную язву.

89. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где рана представляет собой язвенный пролежень.

90. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где рана

Стр.: 48 RU 2 521 329 C2

представляет собой диабетическую язву.

91. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где рана представляет собой васкулитную язву.

92. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где рана представляет собой кожную язву, возникшую в результате травмы или ожога.

93. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где рана представляет собой незаживающую рану.

94. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где субъект болен диабетом.

95. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где субъект имеет периферическую невропатию.

96. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где субъект имеет нарушение венозных клапанов и/или венозную недостаточность.

97. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где субъект имеет закупорку артерий.

98. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где указанную композицию наносят более одного раза.

99. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где нанесение указанной композиции повторяют примерно раз в неделю.

100. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где указанный полинуклеотид имеет от примерно 18 до примерно 32 нуклеотидов.

101. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где полинуклеотид против коннексина 43 представляет собой модифицированный олигодезоксинуклеотид.

102. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где полинуклеотид против коннексина 43 представляет собой немодифицированный олигодезоксинуклеотид.

103. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где полинуклеотид против коннексина 43 представляет собой немодифицированный антисмысловой полинуклеотид к коннексину 43.

104. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где субъект является человеком.

105. Способ по любому из пп.1, 29, 32, 36, 37, 38, 42, 43, 56, 58 или 59, где субъектом является животное, отличное от человека.

106. Способ по п.105, где животное, отличное от человека, представляет собой сельскохозяйственное животное, животное из зоопарка, спортивное животное или комнатное животное.

107. Способ по п.105, где животное, отличное от человека, представляет собой лошадь, собаку или кошку.

108. Способ по любому из пп.1, 32, 36, 37, 38 или 42, где количество указанного полинуклеотида против коннексина 43, вводимого в указанную рану, находится в диапазоне от 0,01 мг до 1 мг на кг массы тела.

109. Готовое изделие, включающее сосуд, содержащий композицию, содержащую Pluronic F-127 и полинуклеотид против коннексина 43, представленный SEQ ID NO: 1, и инструкции по лечению субъекта, имеющего хроническую рану на коже, путем нанесения на рану композиции от примерно 0.001 мг до примерно 1 мг/кг массы тела.

110. Готовое изделие, включающее сосуд, содержащий композицию, содержащую Pluronic F-127 и полинуклеотид против коннексина 43, представленный SEQ ID NO: 1,

Стр.: 49 RU 2 521 329 C2

и инструкции по лечению субъекта, имеющего хроническую рану на коже, путем нанесения на рану композиции от примерно 0. 01 мг до примерно 10 мг/кг массы тела.

111. Готовое изделие, включающее сосуд, содержащий композицию, содержащую Pluronic F-127 и полинуклеотид против коннексина 43 представленный SEQ ID NO: 1 присутствующий в концентрации от примерно 0.5 до примерно 40,0 мг/мл, и инструкции по лечению субъекта, имеющего хроническую рану на коже, путем нанесения на рану композиции.

112. Готовое изделие по п.111, где полинуклеотид представляет собой немодифицированный олигодезоксинуклеотид.

113. Готовое изделие, включающее сосуд, содержащий одну или несколько доз композиции, содержащей примерно (а) 1-50% полинуклеотида против коннексина 43 представленного SEQ ID NO: 1, в терапевтически эффективной дозе и (b) Pluronic F-127, и инструкции по лечению субъекта, имеющего хроническую рану на коже, путем нанесения на рану композиции в одной или нескольких дозах.

114. Готовое изделие по любому из пп.109-113, где хроническая рана на коже представляет собой венозную язву.

115. Готовое изделие по любому из пп.109-113, где хроническая рана на коже представляет собой варикозную язву вен.

116. Готовое изделие по любому из пп.109-113, где хроническая рана на коже представляет собой диабетическую язву.

117. Готовое изделие по любому из пп.109-113, где хроническая рана на коже представляет собой диабетическую язву стопы.

118. Набор, содержащий одну или несколько композиций, содержащих Pluronic Fи полинуклеотид против коннексина 43, представленный SEQ ID NO: 1, с маркировкой, что она предназначена для местного применения у субъекта, имеющего хроническую рану на коже, в количестве от примерно 0,001 мг до примерно 1 мг/кг массы тела.

119. Набор, содержащий одну или несколько композиций, содержащих Pluronic Fи полинуклеотид против коннексина 43, представленный SEQ ID NO: 1, с маркировкой, что она предназначена для местного применения у субъекта, имеющего хроническую рану на коже, в количестве от примерно 0,01 мг до примерно 10 мг/кг массы тела.

120. Набор, содержащий одну или несколько композиций, содержащих Pluronic Fи полинуклеотид против коннексина 43, представленный SEQ ID NO: 1, присутствующий в концентрации от 0.5 до примерно 40.0 мг/мл, и содержащий маркировку, что композиция или композиции предназначены для местного применения у субъекта, имеющего хронические раны на коже.

121. Набор, содержащий одну или несколько композиций, содержащих Pluronic Fи от 0.5 до примерно 1.0 мг полинуклеотида против коннексина 43, представленного SEQ ID NO: 1, присутствующего в объемной дозе, находящейся в диапазоне от 25-100 мкл от примерно 100-200 мкл, от примерно 200-500 мкл или от примерно 500-1000 мкл, и содержащий маркировку, что композиция или композиции предназначены для местного применения у субъекта имеющего хронические раны на коже.

122. Набор, включающий композицию, содержащую гель Pluronic F-127 и 1-50% полинуклеотида против коннексина 43, представленного SEQ ID NO: 1, в терапевтически эффективной дозе, и содержащий маркировку, что композиция предназначена для местного применения у субъекта, имеющего хронические раны на коже, в виде одной или нескольких доз.

Стр.: 50 RU 2 521 329 C2

123. Набор, включающий терапевтически эффективную дозу полинуклеотида против коннексина 43 для лечения хронических ран на коже, содержащий гель Pluronic F-127 и 1-50% полинуклеотида против коннексина 43, представленного SEQ ID NO: 1.

124. Набор, включающий гель, содержащий гель Pluronic F-127 и полинуклеотид против коннексина 43, представленный SEQ ID NO: 1, в эффективной для лечения хронических ран на коже дозовой концентрации.

125. Набор по любому из пп.118-124, где полинуклеотид представляет собой немодифицированный олигодезоксинуклеотид.

126. Набор по любому из пп.118-124, где хроническая рана на коже представляет собой венозную язву.

127. Набор по любому из пп.118-124, где хроническая рана на коже представляет собой варикозную язву вен.

128. Набор по любому из пп.118-124, где хроническая рана на коже представляет собой диабетическую язву.

129. Набор по любому из пп.118-124, где хроническая рана на коже представляет собой диабетическую язву стопы.

–  –  –

Стр.: 52 RU 2 521 329 C2 Стр.: 53 RU 2 521 329 C2 Стр.: 54 RU 2 521 329 C2 Стр.: 55 RU 2 521 329 C2 Стр.: 56 RU 2 521 329 C2 Стр.: 57 RU 2 521 329 C2 Стр.: 58 RU 2 521 329 C2

Pages:     | 1 ||
Похожие работы:

«ШИМИЧЕВ Алексей Сергеевич ФОРМИРОВАНИЕ ГРАММАТИЧЕСКОЙ КОМПЕТЕНЦИИ СТУДЕНТОВ БАКАЛАВРИАТА ПО НАПРАВЛЕНИЮ ПОДГОТОВКИ "ЛИНГВИСТИКА" (МЕЖКУЛЬТУРНЫЙ ПОДХОД) Специальность 13.00.02 – теория и методика обучения и воспитания (иностранный язык...»

«Педагогіка Е.М. ЕВИЧ ЭМОЦИОНАЛЬНО-ЭСТЕТИЧЕСКОЕ РАЗВИТИЕ СТАРШЕКЛАССНИКОВ НА УРОКАХ РУССКОЙ ЛИТЕРАТУРЫ The article is devoted to emotional-aesthe­ Анализируется проблема эмоциональ­ tic perception by senior pupils of works of art но-эстетического восприятия произведений during the proce...»

«Работа выполнена на кафедре педагогики и психологии ГОУ ВПО Челябинская государственная академия культуры и искусств Научный руководитель: доктор педагогических наук, профессор Литвак Римма Алексеевна Официаль...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РФ Филиал федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования "Кемеровский государственный университет" в г. Анжеро-Судженске (АСФ КемГУ) Кафедра иностранных языков Рабочая программа дисциплины Теория и методика обучения инос...»

«220 или молодежью в целом. Дети и подростки, в свою очередь, стремятся к скорому взрослению, желают добиться статуса независимости, принимают решения, чтобы доказать что-либо себе или другим, не задумываясь о последствиях. "Сердце боксера" – пьеса отчасти идеалистическая: далеко не всегда мл...»

«УДК: 370.711р378.169.14+372.21+700 ЭТАПЫ РЕАЛИЗАЦИИ ПЕДАГОГИЧЕСКИХ УСЛОВИЙ ПОДГОТОВКИ БУДУЩИХ ВОСПИТАТЕЛЕЙ: К ОРГАНИЗАЦИИ ИЗОБРАЗИТЕЛЬНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ С ДЕТЬМИ РАЗНОВОЗРАСТНОЙ ГРУППЫ А.К. Кавылина В статье рассмотрены этапы реализа...»

«AutoExpert DVR-782 Автомобильный видеорегистратор в зеркале заднего вида FullHD Инструкция по эксплуатации Благодарим за приобретение продукции AutoExpert Пожалуйста внимательно изучите инструкцию по эксплу...»

«УДК 159 Ярошевич Татьяна Михайловна аспирант кафедры педагогики высшей школы и современных воспитательных технологий учреждения образования Белорусского государственного педагогическ...»

«УДК 37.048.45 Панина Светлана Викторовна Panina Svetlana Viktorovna кандидат педагогических наук, PhD in Education Science, Assistant Professor of доцент кафедры педагогики the Educatio...»

«УДК 159.9:378(470 + 571) Динь Тхи Тхиен Ай Dinh Thi Hien Ai аспирант кафедры непрерывного PhD student, Continuous Psychological психолого-педагогического образования and Pedagogical Training Department, Ивановского государственного университета Ivanovo State University...»

«№ 1(9), февраль 2014 г. Гуманитарные ведомости ТГПУ им. Л. Н. Толстого УДК 378.147 А.А. Извольская ТГПУ им. Л.Н. Толстого (г. Тула, Россия) Тел.:8-915-697-00-97, e-mail: zayac8607@mail.ru ЦЕННОСТНОЕ ОТНОШЕНИЕ К ПЕДАГОГИЧЕСКИМ ЗНАНИЯМ КАК ФАКТОР ПРЕОДОЛЕНИЯ ПО...»

«Общественный центр экспертиз по информационным и документационным спорам при ОФ "діл сз" ЗАКЛЮЧЕНИЕ СПЕЦИАЛИСТА № 411 -Э г. Алматы 19 июня 2013 г. Специалист, научная степень, ФИО (специальность: №, название...»

«УДК 37.2 Захарова Лариса Михайловна Zakharova Larisa Mikhaylovna доктор педагогических наук, доцент, PhD in Education Science, заведующий кафедрой дошкольной педагогики Assistant Professor, Ульяновский государственный педагогический Head of the Preschool Education Subde...»

«Муниципальное бюджетное образовательное учреждение дополнительного образования Подпорожская детская школа искусств Ленинградская область "Поэзия – венец познанья." cценарий поэтической композиции, посвящённый жизни и творчеству поэта А.Н.Майкова Подготовила Аполлонова Галина Васильевна преподаватель т...»

«Купить в Беларуси: http://belveter.by Купить в России: http://mlbv.ru Пособие для учителей учреждений общего среднего образования 5-е издание, исправленное и дополненное Мозырь "Белый Ветер" Купить в Беларуси: http://belveter.by Купить в России: http://mlbv.ru...»










 
2017 www.lib.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - электронные материалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.